Využití metody HPLC pro detekci polymorfizmu Val158Met genu pro COMT
Autoři | |
---|---|
Rok publikování | 2003 |
Druh | Článek v odborném periodiku |
Časopis / Zdroj | Psychiatrie |
Fakulta / Pracoviště MU | |
Citace | |
Obor | Biochemie |
Klíčová slova | HPLC Val158Met COMT association study alcoholism |
Popis | DNA diagnostické metody v posledních letech zaznamenávají prudký vývoj a zároveň posun do oblasti automatizace. Jednou z metod, které lze využít pro automatizovanou detekci polymorfizmů DNA je metoda HPLC. Amplifikovaná DNA je buď nejprve štěpena restrikčním enzymem nebo v případě délkového polymorfizmu je amplifikovaná DNA přímo použita pro HPLC detekci. Jako nejvhodnější kolona pro HPLC detekci polymorfních úseků DNA je iontoměničová kolona plněná neporézní matricí, na které je kovalentně navázána fáze diethylaminoethylové zbytky, které matrici udílejí kladný náboj. K vymytí DNA z kolony se používá gradient chloridu sodného, kdy chloridové ionty postupně vytěsní navázané molekuly DNA. Tato metodika výrazně usnadňuje, urychluje a zlevňuje detekci DNA polymorfizmů ve srovnání s detekcí na agarózových nebo polyakrylamidových gelech, navíc pak umožňuje vyloučení práce s toxickými látkami jako jsou ethidium bromid nebo akrylamid. |
Související projekty: |