Sensitive Detection and Separation of Fluorescent Derivatives using Capillary Electrophoresis with Laser-Induced Fluorescence Detection with 532 nm Nd:YAG Laser

Logo poskytovatele

Varování

Publikace nespadá pod Filozofickou fakultu, ale pod Přírodovědeckou fakultu. Oficiální stránka publikace je na webu muni.cz.
Název česky Citlivá detekce a separace fluoreskujících derivátů pomocí kapilární elektroforézy s laserem indukovanou fluorescenční detekcí s 532 nm laserem Nd: YAG
Autoři

VRÁBEL Patrik TÁBORSKÝ Petr RYVOLOVÁ Markéta HAVEL Josef PREISLER Jan

Rok publikování 2006
Druh Článek v odborném periodiku
Časopis / Zdroj Journal of Luminescence
Fakulta / Pracoviště MU

Přírodovědecká fakulta

Citace
www http://www.elsevier.com/wps/find/journaldescription.cws_home/505700/description?navopenmenu=-2
Obor Analytická chemie, separace
Klíčová slova Electrophoresis; Fluorescence; Derivatization; RBITC; Proteins; Rhodamine; 532 nm Laser.
Popis Metoda kapilární elektroforézy s laserem indukovanou fluorescenční detekcí je silným nástrojem pro separaci a citlivou detekci fluoreskujících látek. Mnohé biologicky aktivní látky, jako jsou například peptidy a proteiny mohou přirozeně fluoreskovat, ovšem nativní fluorescence je často nedostatečná a/nebo je nezbytné využít nákladný laser pro excitaci v UV oblasti záření. Výhodné řešení je potom derivatizovat látky pomocí fluoreskujících činidel exctitovatelných běžnými typy laserů a s vysokým kvantovým výtěžkem. V této práci byl laboratorně sestaven a s využitím rhodaminových barviv odladěn prototyp přístroje pro CELIF s diodově pumpovaným Nd:YAG excitačním laserem se stabilizací zpětnou vazbou a násobičem frekvence 2x (532 nm). Rozsah použití a účinnost tohoto laseru pro CELIF byly vyhodnoceny a otestovány mezi prvními. Detekční limit 2E-13 mol/l byl dosažen pro Rhodamin B, což je ve shodě s výsledky pro běžně používaný Ar-ion laser. Experimenty zahrnují příkladovou separaci a stanovení rhodaminových barviv. Isothiokyanát rhodaminu B byl použit pro derivatizaci aminokyselin, peptidů a malých proteinů za podmínek uváděných bežně pro obdobné činidlo na bázi fluoresceinu. Podmínky pro derivatizační reakci jako vhodné rozpouštědlo, pH, čas a teplota byly optimalizovány a je demonstrována optimalizovaná CELIF fluorescenčně značeného hovězího insulinu.
Související projekty:

Používáte starou verzi internetového prohlížeče. Doporučujeme aktualizovat Váš prohlížeč na nejnovější verzi.