SAMPLE INJECTION IN CAPILLARY ELECTROCHROMATOGRAPHY: ASSESSMENT OF SPLITTER UTILIZATION
| Název česky | Dávkování vzorku v kapilární elektrochromatografii: Hodnocení využití splitru |
|---|---|
| Autoři | |
| Rok publikování | 2005 |
| Druh | Článek ve sborníku |
| Konference | Procceding of 11th International Symposium on Separation Sciences |
| Fakulta / Pracoviště MU | |
| Citace | |
| Obor | Biochemie |
| Klíčová slova | CEC; separation |
| Popis | Dávkování vzorku je důležitou součástí každé elektroseparační analýzy. Jsou zde přinejmenším dva důvody proč optimalizovat schéma dávkování. Zaprvé je to opakovatelnost - vysoká opakovatelnost dávkovaného objemu vzorku je základním požadavkem pro zajištění dobré opakovatelnosti CEC analýzy jako celku. Zadruhé je to snaha minimalizovat rozmývání píku způsobené dávkováním vzorku, aby byla zachována vysoká účinnost CEC separace. Prezentovaná dávkovací schémata jsou založena na elektrokinetickém nebo hydrodynamickém principu. Dávkování může být realizováno ponořením kapiláry do zásobníku vzorku, použitím dávkovacího ventilu (rotační ty se 2-6 porty)nebo za využití děliče toku, tzv. splitru. Každý z těchto způsobů má svoje výhody a nevýhody. Metoda namáčení vykazuje nízkou opakovatelnost a dávkovací ventily mají fixní dávkovací objem. Použití splitru se jeví jako nejvhodnější volba. Neustálý tok čerstvé mobilní fáze splitrem brání systém před vyčerpáním pufru a pH změnami a zároveň umožňuje gradientovou eluci. Problémem však je zředění vzorku v transportní kapiláře, která spojuje dávkovací zařízení se splitrem. Vhodným řešením může být použití splitru pracujícího v „heart-cut“ režimu. Studovali jsme mechanismus spontánního (hydrodynamického) a elektrokinetického dávkování vzorku. Provedli jsme automatizovanou CEC analýzu směsi standardů a zhodnotili opakovatelnost isokratické, gradientové a prekoncentrační analýzy. Dosáhli jsme vysoké opakovatelnosti nejen výšky a plochy píků (RSD ~2%) ale také retenčních časů (RSD ~0,5%) díky automatizovanému CEC instrumentu zkonstruovanému v naší laboratoři a laboratorně připraveným monolitickým kolonám. |
| Související projekty: |