Klonování genů fágových lytických enzymů a jejich funkčních domén

• Autoři: BENEŠÍK Martin; BEDNÁŘ David; JANDA Lubomír; DOPITOVÁ Radka; DOŠKAŘ Jiří; PANTŮČEK Roman
• Rok publikování: 2011
• Druh: Konferenční abstrakty
• Fakulta / Pracoviště MU: Přírodovědecká fakulta
• Popis: Vhodnou alternativou léčby bakteriálních infekcí je aplikace fágové terapie. Současným trendem fágové terapie je využití fágem kódovaných proteinů. V této studii jsme se zaměřili na přípravu lytických enzymů z fágů Staphylococcus aureus, který je původcem mnoha závažných onemocnění u člověka i u zvířat. Při svém životním cyklu musí fág dvakrát překonat buněčnou stěnu bakterií, při infekci buňky, kde se uplatňuje enzym bičíková hydroláza a na konci lytického cyklu, kdy buněčnou stěnu bakterie degraduje endolyzin. Gen pro endolyzin fága 812 a jeho mutanty s širším rozmezím hostitele byl klonován do dvou typů vektorů pSP72 a pET28. Endolyzin byl detekován pomocí zymogramu a western blottu. Aktivita lytických enzymů byla testována na souboru kmenů S. aureus, které nebyly citlivé k fágu 812, nebo byly rezistentní k antibiotikům. Enzymy byly účinné proti širšímu spektru bakteriálních kmenů než samotný fág.

Související projekty

• Molekulární podstata buněčných a tkáňových regulací
• Úloha bakteriofágů v horizontálním přenosu genů virulence a rezistence u Staphylococcus aureus