Vliv hypoglykemie na vybrané geny, jejichž expresi zvyšuje hyperglykemie
| Title in English | The effect of hypoglycaemia on expression of genes upregulated by hyperglycaemia |
|---|---|
| Authors | |
| Year of publication | 2014 |
| Type | Conference abstract |
| Citation | |
| Description | Úvod: Nadměrná produkce reaktivních metabolitů kyslíku v mitochondriích způsobená hyperglykemií a následná aktivace několika škodlivých drah má klíčový význam při vzniku a progresi mikrovaskulárních komplikací diabetu. Vliv hypoglykemie, důležitého buněčného stresoru a události často se vyskytující u diabetiků 1. typu a také součásti zvýšené glykemické variability, na dráhy aktivované hyperglykemií je málo prozkoumán. Proto jsme sledovali expresi genů kódujících proteiny/enzymy, které se uplatňují v patogenezi hyperglykemií indukovaného poškození, v podmínkách hypoglykemie in vitro. Konkrétně jsme srovnávali genovou expresi superoxid dismutázy (SOD2), hemoxygenázy (HMOX), podjednotky p65 transkripčního faktoru NF-?B, glyoxalázy 1 (GLO1), receptoru pro pozdní produkty glykace (RAGE) a DJ-1 (enzym s glyoxalázovou aktivitou) mezi buňkami kultivovanými v médiu s různými koncentracemi glukózy. Metodika: Primární lidské endoteliální buňky (HUVEC) a lidské embryonální ledvinné buňky (HEK293) byly po 48 hodinách růstu v příslušném médiu kultivovány 24 hodin v médiu s různým obsahem glukózy: (i) normoglykemie (5 mmol/l), (ii) hyperglykemie (25.5 mmol/l) and (iii) hypoglykemie (2.75 mmol/l). Z buněk byla izolována celková RNA a přepsána pomocí komečních kitů (Roche). Genová exprese byla stanovena pomocí TaqMan sond (Life Technologies). Jako referenční byl použit gen pro 18-S RNA. Výsledky: V souladu s naším předpokladem byla mRNA exprese všech studovaných genů zvýšená v podmínkách hyperglykemie ve srovnání s normoglykemií, statisticky významně pouze v případě GLO1 a p65 (zvýšení o 60 resp. 50%, obě P<0.05). Podobný trend byl pozorován za podmínek hypoglykemie ve srovnání s normoglykemií (nárůst o 25 – 35%, všechna P>0.05) s výjimkou HMOX, jejíž exprese byla mírně (o cca 10 %), ale statisticky nevýznamně snížená. Závěr: Naše pilotní výsledky naznačují, že hypoglykemie může mít na lidské primární endoteliální buňky a embryonální ledvinné buňky podobný vliv jako hyperglykemie a může tak představovat aditivní patogenetický faktor za podmínek vysoké glykemické variability. |
| Related projects: |