Rola katechol-O-metyltransferázy u estrogén-receptor pozitívnych nádorov prsníka
| Title in English | The role of catechol-O-methyltransferase in estrogen-receptor-positive breast tumours |
|---|---|
| Authors | |
| Year of publication | 2020 |
| Type | Conference abstract |
| Citation | |
| Description | Enzým katechol-O-metyltransferáza (COMT) hrá zásadnú úlohu pri detoxikácii katechol estrogénov prenosom metylovej skupiny z S-adenosyl-L-metionínu na estrogénové metabolity, čím zabraňuje ich oxidácii na karcinogénne chinóny. Na základe tejto enzýmovej aktivity sme vytvorili hypotézu o tumor supresorovej úlohe COMT u estrogén receptor (ER) dependentných nádorov prsníka. V tejto štúdii sme sa zamerali na pochopenie dôsledkov zvýšenej expresie COMT na fenotyp nádorových buniek odvodených od ER+ nádorov prsníka pomocou metód systémovej biológie. Pre štúdiu sme vytvorili bunkovú líniu MCF-7 stabilne transdukovanú sekvenciami kódujúcimi COMT a zelený fluorescenčný proteín (GFP)(MCF7-COMT-GFP), líniu MCF7-GFP sme použili ako kontrolnú. Invazivitu oboch línií sme porovnali pomocou Transwell assay, ktorá odhalila zníženú invazívnu kapacitu línie MCF7-COMT voči kontrole. Analýza MCF7-COMT buniek pomocou mikroskopie atómových síl ukázala ich zvýšenú tuhosť, v súlade s ich epiteliálnym fenotypom. Výsledky experimentov na bunkovej úrovni sme doplnili kombináciou proteomiky v data independent acquisition (DIA) móde na platforme Orbitrap Fusion Lumos (Thermo Scientific) a transkriptomiky (RNA-Seq) na platforme Illumina Next-Seq. Medzi najvýznamnejšie koregulované gény a proteíny patrí zvýšená hladina metántioloxidázy spájanej s lepším prežitím u pacientov s ER+ nádormi prsníka a znížená expresia plastínu-2 zapojeného do tumorigenézy a migrácie nádorových buniek. Analýza proteínových interakcií COMT odhalila 22 proteínov zapojených do regulácie bunkovej adhézie a motility, redoxnej homeostázy, transmembránového transportu a metabolizmu. Novo identifikovaná interakcia COMT s inhibítorom proteázy Kunitzovho typu 2 (SPINT2), ktorý inhibuje bunkový rast, adhéziu a motilitu skrz aktivátor hepatocytového rastového faktora (HGF), naznačuje ďalší súvisiaci mechanizmus pôsobenia COMT ako tumor supresora v ER+ nádoroch prsníka. Záverom, v práci sme odhalili mechanizmy súvisiace so zvýšenou hladinou COMT, ktoré podporujú jeho tumor supresorovú úlohu u ER+ nádorov prsníka. |
| Related projects: |