Proteomická analýza vlivu bortezomibu na myelomové buňky
| Authors | |
|---|---|
| Year of publication | 2008 |
| Type | Conference abstract |
| MU Faculty or unit | |
| Citation | |
| Description | Úvod: Mnohočetný myelom (MM) je stále nevyléčitelné onemocnění charakterizované klonální expanzí maligních plazmatických buněk. Nové léky dále zlepšují prognózu nemocných. Bohužel i na tato léčiva je zpravidla 1/3 nemocných rezistentní. Cílem této práce bylo nalézt a charakterizovat proteinové změny v lidské myelomové linii ARH-77 indukované bortezomibem (Velcade), který působí u MM jako silný selektivní inhibitor na chymotrypsin-like aktivitu 20S beta-5 podjednotky proteasomu. Materiál a metody: Buněčná myelomová linie ARH-77 byla kultivovaná po dobu 6-24 hodin s přídavkem bortezomibu o celkové koncentraci 0, 5, 10, 15, 20 nM. K separaci proteinů byla využita dvourozměrná elektroforéza (2D-PAGE) a výsledné proteinové mapy byly podrobeny obrazové analýze umožňující objektivní zhodnocení exprese proteinů v buňce. Rozdílně exprimované proteiny byly identifikovány pomocí hmotnostní spektrometrie (MALDI-MS/MS, LC-MS/MS). Výsledky: V průběhu časového působení bortezomibu na kultivované myelomové buňky docházelo ke zvýšené expresi cytoskeletárních proteinů (gama- aktin, beta- aktin, tubulin- beta 2), regulačního proteinu proteolýzy ubikvitinu (SKP1 isoformy b), TCTP1 proteinu, ANP32A proteinu, SDF2 like proteinu 1, peroxiredoxinu 1 a ko-chaperonu P23. Při působení 20nM Velcade po 24hod působení docházelo ke ztrátě exprese nukleofosminu, HP95, ribosomálního proteinu P0, jaderného ribonukleoproteinu K, protein disulfid isomerázy – related protein 5, transaldolázy 1, enolázy 1, glyoxylázy 1 a ubikvitin specifických peptidáz. Závěr: Byly pozorovány reprodukovatelné změny proteinového profilu vyvolané působením bertezomibu na modelový systém (myelomové buňky, linie ARH-77). Další fáze projektu bude zaměřena na detekci potencionálních markerů rezistence a citlivosti na myelomových buňkách nemocných léčených bortezomibem. |
| Related projects: |