Evaluation of CD34+ - and Lin- -selected cells from peripheral blood stem cell grafts of patients with lymphoma during differentiation in culture ex vivo using a cDNA microarray technique
| Název česky | Analýza CD34+ a Lin- kmenových buněk z periferních krve pacientů s lymfomem během ex vivo diferenciace v kultuře pomocí techniky DNA microarray |
|---|---|
| Autoři | |
| Rok publikování | 2006 |
| Druh | Článek v odborném periodiku |
| Časopis / Zdroj | Experimental hematology |
| Fakulta / Pracoviště MU | |
| Citace | |
| Obor | Onkologie a hematologie |
| Klíčová slova | Hematopoietic stem cells; hematopoietic transplantation; cytokines; ex vivo expansion; immunomagnetic separation |
| Popis | Cíl. Hematopoetické kmenové buňky (frakce CD34+) mají schopnost diferencovat do všech typů krevních buněk a tato schopnost je využívána při transplantacích kostí dřeně a kmenových buněk z periferní krve. Naším cílem bylo vypracovat vhodnou metodu pro stanovení genové exprese v populacích hematopoetických kmenových buněk. Technikou cDNA microarrays jsme porovnávali biologické vlastnosti buněk kultivovaných ex vivo, které byly získány za použití dvou rozdílných metod imunomagnetické separace (pozitivní selekce CD34+ buněk a negativní selekce Lin-). Metody. CD34+ a Lin- buňky jsme izolovali z kmenových buněk z periferní krve (PBSCs) pacientů s non-Hodkingovým lymfomem. Buňky byly vystaveny působení cytokinu PBSCs, FLT-3 ligandu, interleukinu-3, interleukinu-6 a granulocytárnímu faktoru stimulujícímu kolonie. Odběry a analýza buněk na cDNA microarrays proběhly ve dnech 0, 4, 6, 8, 10, 12 a 14. Byla též analyzována totální buněčná expanze, CD34+, colony-forming unit pro granulocyt-makrofágovou a megakaryocytovou expanzi, vitalita a fenotyp buněk. Výsledky. cDNA microarray analýza hematopoetických buněk prokázala rovnocennost obou metod u PBSC vzorků a pomohla charakterizovat diferenciaci buněk pěstovaných ex vivo. Závěr. Náš postup je vhodný pro charakterizaci hematopoetických kmenových buněk pěstovaných ex vivo, ale také k obecnějším účelům. Rovnocennost CD34+ a Lin- selekčních metod u PBSC vzorků, potvrzená cDNA microarrays, by mohla nalézt uplatnění při manipulacích se štěpy při hematopoetických transplantacích. Totální buněčná expanze, utváření kolonií a fenotyp byl u CD34+ a Lin- vzorků srovnatelný. |
| Související projekty: |